Apresentar e discutir os fundamentos das principais ferramentas experimentais e computacionais de bioinformáticas envolvidas na tecnologia de DNA recombinante. Fornecer detalhes sobre a estrutura molecular de genes e genomas, e de toda maquinaria envolvida. Discutir as aplicações da tecnologia.
Bancos de dados, Fundamentos do sequenciamento de genomas, Técnicas de DNA recombinante e aplicações. Reação em Cadeia da Polimerase – PCR – e variações. Etapas da clonagem de DNA. Organismos geneticamente modificados e Biossegurança. Expressão de proteínas recombinantes em procariotos e em eucariotos. Mutagênese sítio direcionada. Proteínas de fusão. Sistema de duplo híbrido e aplicações. Sistemas de complementação. Parte experimental no laboratório de Informática Química: uso de banco de dados genômicos e de proteínas, análise de sequenciamentos de plasmídeos, reconstrução de segmentos de DNA.
1. Bancos de dados: NCBI. 2. Técnicas de DNA recombinante: Vetores de clonagem – Plasmídios, Bacteriófagos e Cosmídeos, Vetores de expressão, Enzimas de restrição, DNA ligase, DNA Polimerases, o cDNA, Primers, Bibliotecas genômicas e de cDNA, Sondas. 3. Reação em Cadeia da Polimerase – PCR: PCR em tempo real, RT-PCR, Multiplex PCR, Nested PCR, PCR competitiva. 4. Fundamentos do sequenciamento de genomas: métodos de sequenciamento. 5. Etapas da clonagem. 6. Organismos geneticamente modificados e Biossegurança. 7. Expressão de proteínas recombinantes em procariotos e em eucariotos: vantagens e desvantagens. 8. Mutagênese sítio direcionada. 9. Proteínas de fusão e aplicações em biologia celular e na biotecnologia. 10. Aplicações: Transgênicos, Terapia Gênica, Análise Forense. 11. Parte experimental no laboratório de Informática Química: uso de banco de dados genômicos e de proteínas, análise de sequenciamentos de plasmídeos, reconstrução de segmentos de DNA.
Alberts, B. (2011). Biologia Molecular da Célula. 5ª ed. ARTMED Editora Lodish, H. (2014). Biologia Celular e Molecular - 7ª Ed. ARTMED Editora Junqueira e Caneiro, (2012). Biologia Celular e Molecular - 9ª Ed. Guanabara Koogan Watson, J.D. (2009). DNA Recombinante. Genes e Genomas, 3ª Ed. ARTMED Editora Voet, D., Voet, J.G. Bioquímica (2013). 4º ed. ARTMED Editora