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Júpiter - Sistema de Graduação

Instituto de Química de São Carlos
 
Química e Física Molecular
 
Disciplina: SQM0425 - Isolamento e Purificação de Biomoléculas
Biomolecules Isolation and Purification

Créditos Aula: 2
Créditos Trabalho: 1
Carga Horária Total: 60 h
Tipo: Semestral
Ativação: 01/01/2017 Desativação:

Objetivos
Levar o aluno a relacionar as propriedades físico-químicas das biomoléculas e diagnosticar as metodologias (clássicas e modernas) disponíveis a serem utilizadas na purificação e caracterização das mesmas.
 
 
 
Docente(s) Responsável(eis)
61019 - Emanuel Carrilho
5851343 - Fernanda Canduri
71038 - Fernando Mauro Lanças
 
Programa Resumido
Propriedades das diferentes classes de biomoléculas. Métodos de isolamento baseados em solubilidade. Procedimentos de ultrafiltrações e dialo-filtrações. Cromatografias baseadas em tamanho molecular. Cromatografia em fase gasosa. Métodos de separação baseados nas propriedades físico-químicas. Cromatografias de afinidade. Cromatografias automatizadas em baixa, média e alta pressões. Espectroscopia de massa. Caracterização e critérios de homogeineidade de biomoléculas purificadas. Análise do conteúdo em aminoácidos e sequenciamento de proteínas.
 
 
 
Programa
Introdução: métodos físicos, métodos químicos e métodos enzimáticos. Extração líquido-líquido, coeficiente de distribuição e métodos de precipitação. Métodos físicos: rompimento celular, filtração, centrifugação, separação por membranas e precipitação. Liofilização, secagem, cristalização, monitoramento do processo de purificação, integração de processos. Cromatografia: Conceitos e instrumentação, cromatografia de exclusão molecular, cromatografia de troca iônica, cromatografia de interação hidrofóbica, cromatografia de afinidade. Eletroforese: Conceitos e instrumentação, eletroforese em gel, eletroforese capilar, sistemas microfluídicos, sequenciamento de DNA. Espectrometria de massas: Conceitos e instrumentação, análises proteômicas e identificação de proteínas, análise metabolômica e identificação de metabolitos e pequenas moléculas biologicamente ativas.
 
 
 
Avaliação
     
Método
Aulas expositivas por docente, apresentação de seminários por discentes e de exercícios/ensaios para solução de problemas selecionados.
Critério
Duas provas de pesos iguais valendo 60% da nota. Apresentação de um seminário valendo 10% da nota. Trabalhos apresentados valendo 30% da nota.
Norma de Recuperação
70% de presença e média menor do que 5,0 e maior ou igual a 3,0. CRITÉRIO DE APROVAÇÃO: Nota igual ou superior a 5,0 em uma única prova cobrindo todo o programa da disciplina. ÉPOCA DE REALIZAÇÃO DA PROVA: Última semana de férias.
 
Bibliografia
     
Andreas Manz, Petra S Dittrich, Nicole Pamme, Dimitri Iossifidis. Bioanalytical Chemistry: 2o. Ed. Imperial College Press, 2015. Voet D. & Voet J. Biochemistry. Ed. John Wiley & Sons, N. Y., 1995. Nelson, D. L. & Cox, M. M. Lehninger Principles of Biochemistry, 3rd Edition, Worth Publishers, New York, 2000. Stryer, L. Biochemistry. W. H. Freeman and Company, N. Y., 1995. Mant, C. T. & Rodges, R. S., editors, High-Performance Liquid Chromatography of Peptides and Proteínas: Separation, Analysis and Conformation, Ed. CRC Press, USA, 1991. Pascal Bailon, et al (2000). Affinity Chromatography: Methods and Protocols (Methods in Molecular Biology). Humana Press. Niessen, W. M. A.; Niessen W. (1998). Liquid Chromatography - Mass Spectrometry. Marcel Dekker; 2nd edition, 634p. Robert L. Cunico, et al. (1998). Basic HPLC and CE of Biomolecules. Bay Bionalytical Laboratory; 1st edition. 388p.
 

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